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厭氧培養--微生物厭氧培養
1.可利用厭氧產氣袋法進行厭氧培養。
規格2.5L的產氣袋只能將2.5L容積內的氧氣*吸收,轉化成二氧化碳,同理,3,5L的產氣袋能吸收3.5L容積的氧氣。微需要產氣袋和二氧化碳產氣袋亦是如此,為達到相應的氧氣濃度和二氧化碳濃度,不僅容積要固定,放置的培養物數量也基本要裝滿,在出廠前都根據計算設定好了的,所以,培養也需要在設定的條件下進行。
厭氧培養罐有兩種規格:2.5L(13.5*19.7*9.5cm,容納12只9cm標準培養皿),配套使用1只2.5L規格的厭氧產氣袋;7.0L(21.3*28.0*11.2cm,容納42只9cm標準培養皿),配套使用3只2.5L規格的厭氧產氣袋或者2只3.5L的厭氧產氣袋。兩種都是長方體,原廠的產氣袋培養后不會產生負壓,直接可以打開,所以不需要泄壓孔。
2.厭氧袋(Bio-bag)即在塑料袋內造成厭氧環境來培養厭氧菌。塑料袋透明而不透氣,內裝氣體發生管(有的碳酸氫鈉固體以及5%檸檬酸安瓿)、美蘭指示劑管、鈀催化劑管、干燥劑。放入已接種好的平板后,盡量擠出袋內空氣,然后密封袋口。先折斷氣體發生管,后折斷美蘭指示劑管,命名袋內在半小時內造成無氣環境。如不突變表示袋內已達厭氧狀態,可以孵育。
3.厭氧手套箱(Anaerobie glove box)是迄今為止上*的培養厭氧菌儀器之一。它是一個密閉的大型金屬箱,箱的前面有一個有機玻璃做的透明面板,板上裝有兩個手套,可通過手套在箱內進行操作,故名。箱側有一交換室,具有內外二門,內門通箱內先關著。欲放物入箱,先打開外門,放入交換室,關上外門進行抽氣和換氣(H2,CO2,N2)達到厭氧狀態,然后手伸入手套把交換室內門打開,將物品移入箱內,關上內門。箱內保持厭氧狀態,也是利用充氣中的氫在鈀的催化下和箱中錢殘余氧化合成水的原理。該箱可調節溫度,本身是孵箱或孵箱即附在其內,還可放入解剖顯微鏡便于觀察厭氧菌菌落,這種厭氧箱適于作厭氧細菌的大量培養研究,大量培養基可放入作預還原和厭氧性無菌試驗。金屬硬壁型厭氧箱的抽氣、充氣、厭氧環境和溫度等均系自動調節。